Analisi avanzata dei principi attivi delle droghe vegetali

Introduzione all'insegnamento
- le principali tecniche strumentali per l'analisi quali e quantitativa dei principi attivi delle droghe vegetali

Spettroscopia UV-Visibile
- principi teorici (la radiazione elettromagnetica e l'equazione di Planck, orbitali molecolari e tipi di transizioni, diagramma di Jablonski, caratteristiche di assorbimento di composti organici, regole di selezione, legge dell'assorbimento, aspetti quantitativi (metodo dello std. esterno, metodo dell'aggiunta standard, analisi di miscele), predizione di assorbimento (Fieser e Woodward, regole di Fieser Kuhn), strumentazione (sorgente, monocromatore, prismi e reticoli, rivelatori, fotodiodi, spettrofotometri a singolo e doppio raggio, spettrofotometri a strisce di diodi).
- Applicazione della spettroscopia UV/VIS all'analisi dei principi attivi delle droghe vegetali: aspetti qualitativi (identificazione e caratterizzazione) e quantitativi.
- Esempi di analisi spettroscopica secondo Farmacopea europea (IX edizione): antocianosidi del mirtillo, olio essenziale di limone, ipericine nell'iperico, estratto secco di aloe vera.

Tecniche separative cromatografiche
- Introduzione all'analisi cromatografia (cenni storici, classificazione e tecniche cromatografiche, il cromatogramma, fattore di ritenzione, risoluzione cromatografica, teoria dei piatti, efficienza e selettività, l'equazione di Van Deemter, il problema generale della eluizione, simmetria dei picchi).

Gas-cromatografia
- Principi generali: classificazione delle tecniche gas-cromatografiche, strumentazione e fasi stazionarie, derivatizzazione, analisi quantitativa,
- applicazioni della GC per l'analisi quali e quantitativa dei principi attivi delle droghe vegetali; esempi di analisi in GC secondo Farmacopea europea (IX edizione): oli essenziali, solventi residui e pesticidi.

Cromatografia liquida ad alte prestazioni
- Principi generali: classificazione delle tecniche HPLC, le fasi stazionarie e mobili, UHPLC e nano-HPLC, strumentazione e rivelatori, analisi quantitativa in HPLC;
- applicazioni della cromatografia nell'analisi quantitativa dei principi attivi delle droghe vegetali (esempli applicativi dalla vigente Farmacopea europea).
Analisi delle catechine nel te verde, ginsenosidi nell'estratto secco di ginseng,acidi gincolici e lattoni terpenici nel ginkgo biloba.

Spettrometria di massa
- Principi generali: Principi della ionizzazione e della dissociazione degli ioni, composizione isotopica e massa accurata, strumentazione (sorgenti e analizzatori), regola dell'azoto.
- Applicazione della spettrometria di massa nella identificazione, caratterizzazione quantizzazione di principi attivi delle droghe vegetali. Determinazione della formula bruta a partire dallo spettro di massa e pattern isotopico, identificazione degli analiti mediante banca dati, studi di frammentazione,.

Sviluppo e convalida di un metodo analitico
- criteri per la scelta del metodo analitico ottimale, sviluppo e ottimizzazione del metodo strumentale, convalida del metodo analitico.

Preparazione del campione
- campionamento, preparazione e conservazione del campione, tecniche di preparazione del campione, estrazione liquido-liquido, estrazione liquido-solido, estrazione in fase solida, aspetti sperimentali e applicativi.

Analisi da farmacopea:
- determinazione del contenuto degli olii essenziali, determinazione acqua in droghe contenenti volatili, grado alcolico tinture madri.

Esempi applicativi delle tecniche analitiche per l'identificazione di analiti in matrici, studio di chemotassonomia, spiegazione di bioattività, controllo qualità, adulterazione, contraffazione, e analisi di inquinanti