Virologia molecolare e malattie infettive

Didattica frontale (40 h)

Introduzione al corso (2 h)
Replicazione virale. Strategie moltiplicative dei microrganismi. Primi studi su virus batterici ed animali. Fasi di replicazione virale: adsorbimento.

Ciclo replicativo e fasi di replicazione virale (2 h)
Recettori specifici e aspecifici. Recettori e corecettori del virus HIV. Downmodulazione.

Ciclo replicativo e fasi di replicazione virale (2 h)
Penetrazione e uncoating.

Ciclo replicativo e fasi di replicazione virale (2 h)
Replicazione ed espressione del genoma. Assemblaggio, maturazione e rilascio della particella virale.

Regolazione dell'espressione genica nei microrganismi (1 h)
Controllo dell'espressione genica nei procarioti ed eucarioti. Regolazione dell'espressione in alcuni virus animali.

Regolazione dell'espressione in SV40 (1 h)
Caratteristiche generali, controllo trascrizionale e traduzionale.
Regolazione dell'espressione nei Poxvirus (1 h)
Caratteristiche generali, controllo trascrizionale e traduzionale.

Regolazione dell'espressione nei Retrovirus (1 h)
Caratteristiche generali, controllo trascrizionale e traduzionale. Meccanismi di controllo adottati dai diversi retrovirus. Il virus HIV: caratteristiche generali e ciclo replicativo.

Regolazione dell'espressione genica in HIV (2 h)
Geni strutturali, regolatori ed accessori. Controllo trascrizionale di HIV: le LTR e le diverse regioni. TAR e tat: meccanismo di regolazione della trascrizione. Controllo post-trascrizionale: RRE e rev, meccanismo di regolazione post-trascrizionale.

Immunità virale (4 h)
Immunità umorale e cellulo-mediata. Prevenzione e terapia delle infezioni virali. Caratteristiche dei diversi tipi di vaccini: vantaggi e svantaggi. Vaccini vivi attenuati ed inattivati. Vaccini costituiti da subunità, sintetici e ricombinanti.

Vaccini ricombinanti basati su vettori virali e terapie antivirali (4 h)
Vettori virali. Ragioni che giustificano la costruzione di vaccini ricombinanti. Vantaggi dei poxvirus quali vettori di espressione. La ricombinazione omologa: ingegnerizzazione del plasmide e mutagenesi sito-specifica. Clonaggio, strategia di ricombinazione, selezione dei ricombinanti, amplificazione e purificazione dei ricombinanti. Cenni sulle terapie antivirali.

Verifica dell'espressione di geni eterologhi (2 h)
Test di immunofluorescenza, immunoprecipitazione e Western blot.

Verifica dell'efficacia di un vaccino (2 h)
Test di Elisa, neutralizzazione, linfoproliferazione e citotossicità.

Malattie a trasmissione sessuale (4 h)
Sifilide, blenorragia, ulcera molle, linfogranuloma venereo, papillomatosi, AIDS.

Malattie a trasmissione aerogena (6 h)
Varicella, morbillo, rosolia, parotite epidemica, influenza, SARS. Il vaiolo quale esempio di patologia eradicata. Scarlattina, meningite cerebro-spinale, pertosse, difterite, TBC.

Malattie a trasmissione oro-fecale (2 h)
Tifo, paratifo e colera.

Malattie trasmesse da vettori animati e inanimati (2 h)
Febbre gialla, malaria, peste, rabbia, tetano, carbonchio.


Esercitazioni (16 h)

Tripsinizzazione cellule. Conta e piastratura delle cellule su vetrini sterilizzati (4 h).
Preparazione delle diluizioni virali. Infezione virale delle cellule piastrate (4 h).
Test di immunofluorescenza. Visualizzazione dei vetrini al microscopio ottico a fluorescenza (8 h).